В настоящем пособии мы приводим методику получения и длительного лабораторного культивирования одноклеточных водорослей, которая успешно применяется в Центре культивирования морских микроводорослей ИБМ ДВО РАН. В настоящее время мы поддерживаем коллекцию культур морских микроводорослей, включающую 31 вид и 39 штаммов, среди которых есть клоны и штаммы видов, продуцирующих фикотоксины. В качестве примера культивирования токсичных видов микроводорослей дано описание методик получения клоновых культур видов рода Alexandrium, продуцирующих сакситоксин, и штаммов видов рода Pseudo-nitzschia, продуцирующих домоевую кислоту.
Метод получения культур одноклеточных водорослей основан на их изолировании из проб морской воды или поверхностных осадков и выращивании в условиях лабораторной культуры. Критерием успешного применения методических рекомендаций является получение альгологически чистой культуры вида, рост которой описывается S-образной кривой. Для динофлагеллят рекомендовано получение клоновой культуры, которую выделяют из одной цисты и которая характеризуется тем, что все клетки в такой культуре генетически идентичны исходному материалу. Для диатомовых водорослей предлагается методика получения штаммов микроводорослей, выделенных из одной клетки или цепочки, взятых из природной среды. Численность культуры на стадии экспоненциального роста должна быть не менее 1×104 клеток/мл. Для поддержания экспоненциального роста микроводорослей пересев на свежеприготовленную среду осуществляется регулярно, не реже одного раза в 7 сут.
Полный перечень средств измерений, реактивов, вспомогательных устройств и материалов, необходимых для культивирования микроводорослей, приведен в Приложении 1.